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雙抗體夾心法檢測原理是:首先將能夠結合同一抗原的一對抗體分別固定于免疫層析檢測試紙條的檢測線(T線)與結合墊上,結合墊上的抗體帶有顯色標記(熒光標記、膠體金標記或彩色微球標記)。在試紙條滴樣處滴加樣品,樣品會向試紙條另一端流動,當流動至結合...
2021-04-03
微球共價偶聯一,引言當包被微球時,許多策略可以考慮,包括共價偶聯,吸附和親和力結合。每種方法都有其優點和缺點,應在研究目標,試劑要求,技術人員/實驗室專業知識,時間表等背景下加以考慮。當需要非?;钴S和穩定的微球試劑時,共價偶聯通常用于固定生物分子。因為:?      生物分子是永久性結合的,不會隨著時間的推移而解吸/浸出;?      消除微球之間的“串擾”,可以進行多重測試和測定;·   ...
2021-04-03
膠體穩定性注意事項乳膠微球以良好分散的形式在水性懸浮液中提供。它們在沒有任何特定原因(例如抗體與抗原的相互作用)的情況下聚集,這是由于范德華力在顆粒之間起作用所致。 其效果是累加的,即由大量原子組成的膠體粒子,粒子彼此“吸引”的距離可以達到0.5 μm。1.    兩個乳膠微球之間的排斥粒子中的靜電排斥力足夠強,以使粒子在類似于吸引物的距離上“感覺”到排斥力。推斥力是根據靠近表面的電荷所產生...
2021-06-23
表面特性即使顆粒表面帶電,疏水性膠乳也會與任何疏水性分子牢固結合,包括蛋白質,核酸和許多小生物分子,例如藥物和激素。疏水性乳膠產品通常在不含生物分子的系統中穩定。但是,在生物系統中,包括在免疫測定中的應用,微球很容易被各種蛋白質或多糖包被,大大降低了它們非特異性吸收生物分子的能力。蛋白質分子(如抗生物素蛋白,鏈霉親和素和抗體)的特定不可逆吸附是通過簡單地將乳膠和蛋白質混合在一起一段指定的時間...
2021-06-02
何為乳膠微球?膠體尺寸范圍內的球形聚合物顆粒,乳膠微球是由無定形聚合物(通常是聚苯乙烯)形成的。對于直徑<100 nm的顆粒,顆粒中聚合物鏈的平均分子量約為1x106g,對于較大的顆粒,下降至約2.4x105g。 聚苯乙烯鏈是直鏈烴鏈,其苯環與第二個碳原子相連。芳香環控制聚合物鏈纏繞并控制空間的方式。當查看粒子表面模型時,只能看到隨機堆疊的苯環,偶爾會有鏈末端伸出。因此,該表面具有非常疏水的...
2021-05-26
常見問題解決方案問題:無法吸收蛋白質。解決方案:a. 添加更多的配體(更濃縮的溶液)。b. 去除一些表面活性劑,為表面留出配體吸附空間。c. 用可以很好地粘附在顆粒上,并且可以與配體結合中間材料預涂微球。d. 使用不同的緩沖液(不同的pH,離子強度等)。問題:有很多配體結合,但是沒有活性(方向不正確或堆積太緊密)。解決方案:a. 嘗試或多或少的配體。 (吸附分子的方向通常受到空間因素的強烈影...
2021-05-19
阻斷劑微球包被后,通常將封閉劑(通過吸附)包被在微球上。使用溶解在存儲緩沖液中的物質將阻止聚合物微球暴露疏水表面,將減少微球的非特異性結合和自聚集。這些化合物也用于使包被的微球與樣品中的非目標分子之間的非特異性相互作用(例如蛋白質與聚合物表面之間的疏水相互作用)最小化。應當仔細選擇封閉劑,以確保其有效地減少非特異性相互作用;某些阻斷劑可能會干擾測試/測定,或實際上有助于非特異性結合。應該評估...
2021-04-18
緩沖液以下是吸附方案中常用緩沖液的一些基本配方。 通常,最大吸附發生在蛋白質的pI處或附近,因此應相應地選擇緩沖液。 另外,許多研究人員報告說,以大約0.15 M的生理濃度向耦合緩沖液中添加NaCl可以提高吸附效率。 此信息僅作為一般指南。 可以根據您的應用需求隨意替換緩沖液和/或調整濃度。1.    概述對于微球吸附方案中常用緩沖液的一些基本配方,通常,最大吸附發生在蛋白質的pI處或附近,...
2021-04-18
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